INFORME CIENTÍFICO-TECNOLÓGICO[1]

 

PERIODO: 2001 y 2002

 

                                                                                                        Legajo Nº:

 

1.       APELLIDO: Balatti

NOMBRES: Pedro Alberto

 

2.       TEMA DE INVESTIGACION

InteracciónPlanta Microorganismos biología, genética  y bases moleculares

 

 

 


3.       DATOS RELATIVOS A INGRESO Y PROMOCIONES EN LA CARRERA

INGRESO: Categoría:Asistente    Mes: Septiembre          Año: 1987

ACTUAL: Categoría: Independiente         desde el mes: Junio Año: 1998

 

4.       INSTITUCION DONDE DESARROLLA LA TAREA

Nombre:  Instituto de Fisiología Vegetal y-Cátedra de Microbiología Agrícola

Dependencia: Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales Universidad Nacional de La Plata

Dirección: Calle: 61 y diag 113               Nº. Sin Número

Ciudad: La Plata            Pcia: Bs.As  Tel:  423-6618

Dirección electrónica:  pbalatti@ceres.agro.unlp.edu.ar

Cargo que ocupa: Profesor Adjunto.- Vicedirector

 

5.       DIRECTOR DE TRABAJOS. (En el caso que corresponda)

Apellido y Nombres:

Dirección. Calle

Ciudad:   Pcia:   Tel:

Dirección electrónica:

 

 

.......................................................                        ..................................................       

Firma del Director  (si corresponde)                                   Firma del Investigador

 

                                                                                  Fecha:

 

 

 

6.       EXPOSICION SINTETICA DE LA LABOR DESARROLLADA EN EL PERIODO. Debe exponerse, en no más de una página, la orientación impuesta a los trabajos, técnicas y métodos empleados, principales resultados obtenidos y dificultades encontradas en el plano científico y material. Si corresponde, explicite la importancia de sus trabajos con relación a los intereses de la Provincia.

 

Los trabajos se han orientado a estudiar la dinámica de los microorganismos en el suelo, se trabajo sobre dos sistemas la simbiosis rizobio soja y sobre Phaseolus vulgaris, la diversidad genética que se encuentra en la región de origen del poroto en nuestro país y el impacto de una enfermedad causada por un hongo Phaeisariopsis griseola.

Se comprob
ó que la incompatibilidad entre los cultivares mejorados de soja y los rizobios de crecimiento rápido Sinorhizobium fredii es la excepción y no la regla en los rizobios de esta especie. Este no es un dato menor considerando que muchos de estos rizobios se ha demostrado tienen una  alta eficiencia de fijación de nitrógeno en ciertas condiciones de cultivo por lo que son una fuente alternativa de recursos para la fabricación de inoculantes.

Se analizó la diversidad  genética existente en los rizobios de crecimiento rápido que nodulan la soja. Por medio de la reacción en cadena de la polimerasa y con diversos primers se generaron marcadores ERIC, REP y RAPD. Además, se amplificó el RNA de 16S el que restringión con endonucleasas.  Por medio de estos marcadores se estableció, entre los representantes de Sinorhizobium fredii aislados de la China y Vietnam y Rhizobium sp. NGR234, la diversidad genética existente entre ellos. Además se obtuvo la secuencia completa del 16S AND, el análisis de esta secuencia indicó en primer lugar que Rhizobium sp NGR234 es un Sinorhizobium fredii. En segundo lugar que dos estirpes de de rizobios de crecimiento rápido HH303 y SMH13 pertenecen a otra especie de rizobios aún no descripta. Esto se debe a que presentan no solo diferencias genéticas sino además diferencias en su comportamiento.

Se analizó la diversidad genética existente en 10 cultivares comerciales de poroto y se encontró que la diversidad genetica es baja lo cual se observó por medio de marcadores RAPD. Estos marcadores moleculares y los ISSR permtieron asociar a los cultivares de poroto de acuerdo al pool de origen en Mesoamericanos y Andinos. Por otro lado estos trabajos permitieron observar que el porcentaje de cruzamiento del poroto probablemente sea superior al 10%.

En la simbiosis rizobio soja se está estudiando la respuesta de los rizobios de crecimiento rápido Sinorhizobium fredii y lento Bradyrhizobium japonicum al efecto de diversos factores ambientales. Para cumplir con estos objetivos se utilizan técnicas microbiológicas convencionales junto con técnicas moleculares. Se ha estudiado el fecto del estrés de agua sobre la sobrevivencia y se encontró que potenciales de agua del suelo equivalentes al punto de marchitez permanente provovan la muerte de los rizobios, aunque  los Bradyrhizobios demostraron una capacidad de sobrevivencia superior a los Sinorhizobium fredii. En suelos a capacidad de campo, las dos bacterias muestran capacidad de sobrevivencia aunque  la dinámica de cada una de las especies en el suelo fue distinta. También se estudió la respuesta de los Sinorhizobios y los Bradyrhizobios al pH del suelo y se encontró que al menos ciertas cepas de Sinorhizobium no se adaptan a pH ácidos. Se realizaron estudios con nuevos aislamientos de Sinorhizobium fredii y se aislaron un conjunto de cepas que se adaptan a suelos ácidos, habiéndose encontrado un rango casi contínuo de respuestas a la acidez, especialmente con tres de los aislamientos. Uno de ellos es una bacteria que desarrolla a pH tan bajos como 5.5. Además se han generado mutantes por inserción de un transposon que origina uniones transcripcionales, que permite estudiar la expresión de genes. En base a esto se han aislado unos 20 mutantes en los que se inactivaron genes que se inducen con estres de pH o que generan morfología de colonias distintas lo que en definitiva es una forma de selección de mutantes.

En lo que hace al poroto Phaseolus vulgaris se han realizado estudios utilizando marcadores moleculares RAPD e ISSR para identificar la diversidad genética existente en cultivares silvetres y primitivos de poroto que han demostrado un alto nivel de resistencia al ataque del hongo Phaeisariopsis griseola. Este hongo se encuentra dsitribuído en toda la zona de cultivo y en los ultimos años ha provocado grandes ataques, debido a la falta de materiales resistentes y a las condiciones ambientales imperantes en la zona. Hemos realizado una cantidad importante de aislamientos del hongo en la zona de cultivo, asi que disponemos de los primeros aislamientos argetinos y seguimos realizando aislamientos en diversas areas de cultivo. El objetivo de esto es tener elementos de diagnóstico para diseñar una estrategia para controlar la enfermedad. Hemos caracterizado en parte algunos de estos aislamientos, en base a su patogenicidad sobre un total de 12 cultivares diferenciales de poroto y en base a marcadores moleculares. En estos momentos se están realizando los cruzamientos de plantas para obtener las F2 con el fin de hacer los análisis de segregación con el fin de identificar en plantas marcadores moleculares asociados a genes de resistencia a la enfermedad.

Los estudios reealizados sobre la interacción rizobio soja son particularmente importantes  para lo provincia de Buenos Aires. En primer lugar porque el cultivo de la soja es una fuente de divisas importante para la provincia. En segundo lugar porque las fabricas de inoculantes que son, entre otros, los destinatarios de estos estudios se encuentran ubicadas en la provincia de Buenos Aires.

En cuanto a los inconvenientes que se suscitaron estos fueron el resultado de la crisis exonómica que sacudió al país. Esto hizo que no se produjeran los desembolsos de subsidios otorgados. Esto junto con el hecho de que nuestros insumos se cotizan a valor dolar y a que la devaluación triplico el valor de los mismos, hizo que tuviesemos que reducir sustancialmente la actividad en el laboratorio Esto ocurrió a tal punto que en el caso de dos de los trabajos enviados para su publicación hubo que realizar una cooperación con investigadores del exterior para realizar experimentos adicionales sugeridos por los revisores, por lo cual se debió incluir en la publicación a los investigadores extranjeros.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

7.       TRABAJOS DE INVESTIGACION REALIZADOS O PUBLICADOS EN ESTE PERIODO.

7.1     PUBLICACIONES.

CAPÍTULO DE LIBROS

1.       Angular leaf spot a disease caused by the fungus Phaeoisariopsis griseola (Sacc.) Ferraris on Phaseolus spp. Sebastián Stenglein, Daniel Ploper, Oscar Vizgarra and Pedro Balatti*.(Aceptado para su publicación en Advances in  Applied Microbiology-Academic Press).

 ABSTRACT.

Phaeoisariopsis griseola (Sacc.) Ferraris is the causative agent of angular leaf spot, a disease that causes loses of up to 30% on common bean Phaseolus vulgaris L. A detailed description of the biology of fungus, the disease and the cycle are presented. A thorough study of the biology of the organism should contribute to find alternative ways to decrease the incidence of the disease. Since a way to control the disease in areas already infested is needed, disease control is analyzed based on the use of chemicals, on management and on the development of resistant cultivars. The paper raises questions about unknown aspects of the plant-pathogen interaction that may lead to develop either resistant cultivars or better alternative strategies to control the disease.

En esta publicación mi aporte consistió en la lectura de trabajos, en la redacción y edición del manuscrito.

PUBLICACIONES EN REVISTAS CON REFERATO

 

1    Incompatibility may not be the rule in the Sinorhizobium-soybean symbiosis. 2001 Videira L.B., Pastorino G.N. y P.A. Balatti  Soil Biology and Biochemistry Vol 33, 837-840.
Abstract
In this work we confirmed that three Sinorhizobium fredii strains USDA191, SMH12 and HH103 can nodulate and fix nitrogen on 40 soybean cultivars tested. Nitrogen fixation was as in other nitrogen fixing symbiosis the result of the bacterial-plant genome interactions. Based on our results and those of others we propose that compatibility is most probably the rule for the S. fredii- soybean symbiosis.

Mi actividad consistió en generar la hipótesis de trabajo y plantear objetivos claros. Además se realizó el análisis estadístico de los datos, la redacción del manuscrito y el trabajo de edición del mismo.

2.       Sinorhizobium fredii cultured in vitro for industrial production and bacterial cell survival in liquid and peat based inoculum 2002 Videira L.B., Pastor M.D., Lorda G. , Iriarte L. and P.A. Balatti World Journal of Microbiology 18: 193-199.Abstract

Nine different growth media were evaluated to determine the best growing conditions to achieve cultures of a high cell number of fast-growing rhizobia to produce inoculants. We found that Sinorhizobium fredii strains have complex nutritional requirements that were fulfilled by adding  4g/L Amaranthus cruentus L. seed meal to the media. The survival of fast growing strains is a variable trait, but those strains that survived at high levels even after six-month storage, hypernodulated soybeans and fixed atmospheric nitrogen at levels as high as those of Bradyrhizobium japonicum do.

El aporte en este trabajo consistió en plantear la hipótesis de trabajo y el planteo de objetivos claros. Se trabajó en el manteniendo de cultivos puros de los microorganismos y se realizaron algunas de las observaciones. Se realizó el análisis estadístico de los datos, se redactó el manuscrito y se realizó todo el trabajo de edición del manuscrito.

3.       A 260 bp fragment can specifically identify Sinorhizobium fredii isolates. 2002 Videira L.B., Martinez Alcántara V. and P.A. Balatti  Applied Microbiology and Biotechnology 59, 265-269.
Abstract

A pair of primers homologous to the nolXWBTUV locus generated by PCR a 260 bp fragment only in the presence  of S. fredii template DNA of different quality. This resulted in a fast and accurate method for the identification of S. fredii either from pure DNA, whole bacterial cells or nodule extracts. By means of two PCR fragments, one specific for S. fredii  (260-bp) and another one specific for B. japonicum (RSa), we found that S. fredii strain SMH12 and of B. japonicum E109 were equally efficient to develop nodules on soybean plants grown under controlled environmental conditions.

Mi contribución en esta publicación consistió en plantear la hipótesis de trabajo y los objetivos y metodologías del mismo. Además se realizó el análisis estadístico de los datos, se procedióa redactar el manuscritoy en la edición del mismo.

4.    Nitrification potential, dehydrogenase activity and microbial biomass in an argiudol soil cultivated with wheat under two tillering methods G. Diosma1*, S. I. Golik2, H. O. Chidichimo2 and P. A. Balatti1 Aceptado para su publicación en el Spanish Journal of Agricultural Research 2003, 1-11-20

Abstract

The purpose of this work was to analyze the dynamics of soil biomass and its activity in a soil fertilized with N and cultivated under conventional or zero tillage systems. The soil under conventional tillage had larger biomass than under zero tillage but, in this latter condition, it was further increased by the N-fertilization. Dehydrogenase activity in the soil was identical under both management systems suggesting similar levels of activity. In addition, fertilization did not modify the nitrogen mineralization capacity of the soil. Only the addition of calcareous NH4NO3, a fertilizer that releases nitrogen much faster than urea, resulted in the immobilization of nitrogen during wheat tillering, whereas urea did not alter soil N mineralization. The lack of a significant biomass response to tilling practices was reflected by the wheat biomass and grain yield, that was the same under both tilling systems. Only the total N content of wheat was higher under zero tillage than under conventional management, although this did not result in an increment in grain yield.

La contribución la realizé generando la hipótesis de trabajo y los objetivos de trabajo. Además se realizó el análisis estadístico de los datos, la redacción y edición del manuscrito publicado.

7.2      TRABAJOS EN PRENSA Y/O ACEPTADOS PARA SU PUBLICACIÓN.

 

1.       Genetic relationships of common beans (Phaseolus vulgaris) from South America and France detected by Inter Simple Sequence Repeat (ISSR).Galván M Z, Bornet B, Balatti P and M Branchard (Aceptado para su publicación en Euphytica).

 Abstract

In this study, we report the use of ISSR to assess genetic diversity and to determine the relationships among ten cultivars of common bean developed in Argentina and three materials from France. ISSR markers resolved two major groups corresponding to the Andean and Mesoamerican gene pools of common bean. We compared the results of previous analysis, performed with RAPD markers (Galván et al., 2001), with the results generated by means of ISSR. It appears that ISSR are better tools than RAPDs to identify beans by gene pool of origin though they did not revealed as many differences between individuals as RAPDs.

Mi contribución fue la de generar la hipótesis de trabajo en conjunto con el Dr. Blanchard y en el planteo de los objetivos. Además redacté y edite el manuscrito enviado para publicar.

2.    Genetic diversity of fast growing rhizobia that nodulate soybean (Glycine max L. Merr.). G. Saldaña, V. Martinez Alcántara y P.A. Balatti (Aceptado para su publicación en Archives of Microbiology)

     Abstract

     The fast-growing Rhizobium sp. strain NGR234 isolated from Papua New Guinea and 13 strains of Sinorhizobium fredii isolated from China and Vietnam were fingerprinted by means of RAPD, REP, ERIC and ARDRA. ERIC, REP and RAPD markers revealed a considerable genetic diversity among fast-growing rhizobia. Chinese isolates showed higher levels of diversity than those strains isolated from Vietnam. ARDRA analysis revealed three different genotypes among fast-growing rhizobia that nodulate soybean, even though all belonged to a subcluster that included Sinorhizobium saheli and Sinorhizobium meliloti.  Among Sinorhizobium fredii rhizobia two strains, SMH13 and HH303 might be representatives of other species of nitrogen-fixing organisms.

 Although restriction analysis of the nifD-nifK intergenic DNA fragment confirmed the unique nature of Rhizobium sp. strain NGR234, several similarities between Rhizobium sp. strain NGR234 and S. fredii USDA257, the ARDRA analysis and full sequence of the 16S rDNA confirmed that NGR234 is a Sinorhizobium fredii strain. In addition, ARDRA analysis and full sequence of the 16S rDNA suggested that  two strains of rhizobia might be representatives of other species of rhizobia.

Mi contribución en este trabajo consistió en generar la hipótesis de trabajo y los objetivos. Además trabajé en el análisis de los resultados , estando a mi cargo la redacción y edición del manuscrito que se envió para su publicación.

3.       Micromorphological Variability of Leaf Epidermis in Mesoamerican Common Bean (Phaseolus vulgaris L.) Leguminosae. Sebastian A. Stenglein, Ana M. Arambarri, Oscar N. Vizgarra and Pedro A. Balatti (Aceptado para su publicación en Australian Journal of Botany, Febrero 2003).

Abstract.

The purpose of this work was to make a detailed description of leaf epidermal characteristics among four Mesoamerican common bean (Phaseolus vulgaris L.) materials to learn about the topographical features that may play a role in natural plant defence against pathogens and/or drought.Therefore, we studied variability of epidermal cell number mm-2, stomata size and number mm-2, stomatal index, and trichome density and dimensions on both the adaxial and abaxial epidermis. In all the materials studied, both surfaces of the leaves were devoid of wax crystalloids. The leaves were amphistomatic with the guard cells located even to the epidermal cells. Epidermal cells and stomata number mm-2, stomata size, and stomatal index, varied from 439 to 1667, 91 to 606, 15 to 35 (m, and 11,07 to 26,87%, respectively. In addition, Leaf trichome density and length also varied between 0 to 41 mm-2, and 30 to 900 (m, respectively. . Our results demonstrate that common bean materials have variable micromorphological characteristics of the leaf surfaces. Therefore, selecting for leaf characteristics might modify passive resistance to pathogen and drought.Our results also provided a basic and comprehensive description of leaf epidermal microcharacters and though the impact of these traits upon physiology of the plant should be assessed, breeding must be exercised using these characters in order to obtain plants with enhanced resistance to pathogen and/or drought.

 

En esta publicación intervine en el diseño de la hipótesis de trabajo y en el planteo de objetivos, estando a mi cargo la redacción y edición del trabajo.

 

TRABAJOS ENVIADOS Y AUN NO ACEPTADOS PARA SU PUBLICACION. Incluir un resumen de no máas de 200 palabras de cada trabajo, indicando el lugar al que han sido enviados. Adjuntar copia de los manuscritos.

1.       Improvement of DNA isolation methods to obtain DNA free of contaminants ready to be amplify by the polymerase chain reaction. García V., Galván M. and P.A. Balatti (Aceptado para su publicación).

 Abstract

       The efficiency of different DNA isolation protocols to provide herbaceous and tree plants DNA templates free of contaminants suitable for PCR fingerprint was tested. Three  extraction buffers complemented with compunds like PVPPand Chelex, a ionic interchange resin, were assayed. They were combined with two procedures that included phenolic washes. Two protocols proved to be the best, one of them yielded high quality DNA with all the species considered including tree species. However, the other protocol included washes with phenol-chloroform providing  cleaner DNA that resulted in a better quality fingerprint of herbaceous  species but not of trees.

 

En esta publicación intervine en plantear la hipótesis de trabajo y en establecer los objetivos del trabajo. Estuvo también ami cargo la redacción y edición del manuscrito.

 

2. Genetic diversity among wild common beans collected in Northwestern Argentina based on RAPD and morphological data. M.Z. Galván1, M. del C. Menendez-Sevillano, A. M. de Ron2, M. Santalla2 & P. A. Balatti1 (Enviado a GRACE).

Abstract

The genetic diversity among wild populations of common bean was analyzed by means of RAPD markers and morphoagronomic data. The study was performed on ten populations of Phaseolus vulgaris var. aborigineus collected from different sites located in the provinces of Jujuy, Salta and Tucumán in Northwestern Argentina. Ten quantitative traits and thirty-three random primers were scored. Clustering based on morphoagronomic traits and RAPD markers generated similar phenograms that grouped bean populations based on their site of collection. The levels of diversity observed among populations were low suggesting this a common ancestor. The levels of diversity shown by morphoagronomic traits were higher compared to those of molecular markers, most probably due to the effect of the environment. Furthermore, a 480-bp DNA band identified a group of wild populations collected from similar sites. Breeding strategies need to exploit this diversity to broa den the genetic base of commercial beans to develop high yield cultivars.

 En esta publicación intervine en el planteo de la hipótesis y los objetivos del trabajo. También intervine en el análisis de los resultados, realizé la redacción del manuscrito y la edición del trabajo enviado para su publicación.

3.1     TRABAJOS TERMINADOS Y AUN NO ENVIADOS PARA SU PUBLICACION. IIncluir un resumen de no máas de 200 palabras de cada trabajo.

 

1.       GENETIC DIVERSITY AMONG POPULATIONS OF Paspalum dilatatum Poir. ACCESSED BY MEANS OF MORPHOLOGICAL AND MOLECULAR MARKERS . García, María Victoria, Pedro Alberto Balatti & Miguel .J. Arturi

 Abstract

 

            The objective of this work was to analyze the genetic diversity present in eight native populations of P. dilatatum from the Salado basin (province of Buenos Aires, Argentine), based on morphological and molecular data. Also the correspondence between both data  was analyzed.

Eight genotypes randomly selected from eight populations were analyzed.

Six reproductive and six vegetative characters were analyzed. Also, the character resistance to Claviceps paspali was considered. The molecular markers used were RAPDs.

The analysis of the relations between the genotypes through morphological markers was made with a distance coefficient and for molecular markers with similarity coefficient. Phenograms were generated applying the UPGMA technique as a clustering strategy. The correspondence Mantel test was performed to compare the distance and similarity matrices.

The cluster analysis made using morphological data grouped the genotypes by ploidy level. Two groups were generated, one included the pentaploid genotypes and the other the tetraploid genotypes.

Molecular markers grouped the genotypes by geographic origin but not by biotype. This results are complemented to the ones obtained with morphological data.

We conclude that RAPD are appropriate genetic markers to analize P. dilatatum variability. These markers differentiated populations by location of origin, at least four of them. However, they were not able to discriminate between tetraploid and pentaploid genotypes as the morphological characters studied did. Also it can be conclude that the amplified regions by the primers might not be correlated to the morphological traits analyzed.

 

En este trabajo intervine junto con el Ing. Arturi en la construcción de la hipótesis y objetivos del trabajo, colaborando en la redacción  edición del manuscrito que se encuentra casi listo para su envío a la revista.

 

1.1               COMUNICACIONES. Incluir úunicamente un listado y acompañar copia en papel de cada una. (No consignar los trabajos anotados en los subtítulos anteriores).

1.      Estimación de variabilidad mediante caracteres poligénicos y moleculares en poblaciones  naturales de pasto miel (Paspalum dilatatum Poir.). Garcia María V., Arturi Miguel J. y P.A. Balatti. XXX Congreso Argentino de Genética 2001. Pag 143. Presentación de poster como coautor.

2.      Marcadores ISSR: diversidad genetica y acervo de origen de los cultivares de porotos franceses y argentinos. Galván Marta, Bornet Benjamin, Balatti Pedro y Michel Blanchard. XXX Congreso Argentino de Genética. Pag 105. 2001. Presentación en forma de poster como coautor.

3.      Genetic diversity of willow (Salix sp.) based on RAPD markers. Raffaeli Natalia, Marlats Raul y Pedro A. Balatti.XXXVII Annual meeting of the Argentine Society for Biochemistry and Molecular Biology Research. 2001 Biocell Vol 25 Supplement II Pag 66. Presentación en forma de poster como coautor.

4.      Patrón de utilización de fuentes carbonadas por las comunidades heterotróficas de un suelo cultivado con trigo bajo labranza convencional y siembra directa. Diosma G., Chidichimo H.O. y Balatti. P.A. XVIII Congreso Argentino de la Ciencia del Suelo. Puerto Madryn (Chubut), Argentina, 16-19 de Abril de 2002. Presentación en forma de poster como coautor.

5.      Aislamiento y caracterización de rizobios de suelos ácidos y alcalinos que nodulan la soja. Martinez Alcántara V., Pastorino G.N., Videira L., Graham P. y Balatti P.A. XVIII Congreso Argentino de la Ciencia del Suelo. Puerto Madryn (Chubut), Argentina, 16-19 de Abril de 2002. Presentación en forma de poster como coautor.

6.      Mutagenesis de S.fredii, selección de mutantes e identificaciónde genes vinculados al pH. Martinez Alcántara V., Riglos G., Pastorino G., Videira L. y Balatti P.A. XVIII Congreso Argentino de la Ciencia del Suelo. Puerto Madryn (Chubut), Argentina, 16-19 de Abril de 2002. Presentación en forma de poster como coautor.

7.      Fast growing rhizobia isolated from china differ in their tolerance to acidity and nodulateand fix nitrogen on soybean .Martinez Alcántara V.1, Pastorino G.1, Espuny MR.2, Bellogin R.2, Videira L.1, Pastor M.D., Lorda G.3, Graham P.4 and P.A. Balatti1 .18th North American Conference on Symbiotic Nitrogen Fixation and 20th Annual Missouri Plant Biology Symposium June 3-8, 2002  University of Missouri Columbia, Missouri,USA. Presentación en forma de poster como coautor.

8.      Survival ability of Bradyrhizobium japonicum and Sinorhizobium fredii in soils under water stress. Graciela N. Pastorino, Videira L.B., Virginia Martinez Alcántara and P.A. Balatti. 18th North American Conference on Symbiotic Nitrogen Fixation and 20th Annual Missouri Plant Biology Symposium June 3-8, 2002  University of Missouri Columbia, Missouri,USA. Presentación en forma de poster como coautor.

9.       Diversidad genética en poblaciones silvestres de Phaseolus vulgaris mediante marcadores RPD y faseolinas Galván Marta* y Balatti Pedro XXXI Congreso Argentino de Genética. La Plata, 17-20 de Septiembre de 2002. Presentación en forma de poster como coautor.

10.  Estudios preliminares del agente causal de la mancha angular del poroto. Sebastian A. Stenglein*, Carina A. Reyes, Oscar N. Vizgarra, Daniel Ploper & Pedro A. Balatti. Congreso Argentino de Horticultura. Diciembre 2002 Presentación ON-line como coautor.

11.  Variabilidad epidérmico-foliar en materiales Mesoamericanos de poroto negro. Sebastian A. Stenglein*, Ana M. Arambarri, Oscar N. Vizgarra & Pedro A. Balatti. Congreso Argentino de Horticultura. Diciembre 2002 Presentación On-Line como coautor

 

1.2     INFORMES Y MEMORIAS TECNICAS. Incluir un listado y acompañar copia en papel de cada uno o referencia de la labor y del lugar de consulta cuando corresponda.

 

 

2.       TRABAJOS DE DESARROLLO DE TECNOLOGÍAS.

2.1     DESARROLLOS TECNOLÓGICOS.  Describir la naturaleza de la innovación o mejora alcanzada, si se trata de una innovación a nivel regional, nacional o internacional,  con qué financiamiento se ha realizado, su utilización potencial o actual por parte de empresas u otras entidades, incidencia en el mercado y niveles de facturación del respectivo producto o servicio y toda otra información conducente a demostrar la relevancia de la tecnología desarrollada. 

2.2     PATENTES O EQUIVALENTES. Indicar  los datos del registro, si han sido vendidos o licenciados los derechos y todo otro dato que permita evaluar su relevancia.

2.3     OTRAS ACTIVIDADES TECNOLÓGICAS CUYOS RESULTADOS NO SEAN PUBLICABLES  (desarrollo de equipamientos, montajes de laboratorios, etc.).

 

3.       SERVICIOS TECNOLÓGICOS.  Indicar qué tipo de servicios ha realizado, el grado de complejidad de los mismos, qué porcentaje aproximado de su tiempo le demandan y los montos de facturación.

 

 

4.       PUBLICACIONES Y DESARROLLOS EN:

4.1      DOCENCIA

Guía de Trabajos Prácticos de Microbiología Agrícola Microbiología General 1a Parte

4.2      DIVULGACIÓN

 

 

5.       DIRECCION DE BECARIOS Y/O INVESTIGADORES. Indicar nombres de los dirigidos, Instituciones de dependencia, temas de investigación y períodos.

 

Ø       Director de la Ing. Agr. Graciela Noemí Pastorino Beca FOMEC para la realización de estudios de posgrado en  Biotecnología.

Ø       Director de la Lic. Virginia Martinez Alcántara Respuesta de los rizobios de crecimiento rápido a condiciones de estrésde pH. Beca de Estudio de la CICBA. Abril 1999-Abril 2001.

Ø       Director de la Lic. Virginia Martinez Alcántara Respuesta de los rizobios de crecimiento rápido a condiciones de estrésde pH. Beca de Perfeccionamiento de la CICBA. Abril 2001-Abril 2003.

Ø       Director de la Lic. Marta Galván. Identificación de marcadores moleculares de poroto Phaseolus vulgaris asociados a la resistencia a virosis. Beca de Iniciación de la Universidad Nacional de la Plata. Abril 1999-2000.

Ø       Director de la Lic. Marta Galván. Identificación de genes asociados a la mancha angular del Poroto. Beca de Perfeccionamiento de la Universidad Nacional de la Plata. Abril 1999-2000

Ø       Codirector de la Ing. Ftal Natalia Raffaeli Diversidad Genética en Salix analizada por marcadores RAPD e ISSR. Beca de Iniciación Universidad Nacional de La Plata 1/4/2001-1/4/2003 Actualmente realizando un posgrado en Estados Unidos de América con una beca Fullbright

Ø       Director del Ing. Agr. Sebastián Stenglein. Patogenicidad de los aislamientos de Phaeoisariopsis griseola (Sacc.) Ferraris en variedades botánicas de poroto (Phaseolus spp.) Beca de Iniciación CICBA 1/4/2002- 30-3-2003.

 

 

6.       DIRECCION DE TESIS. Indicar nombres de los dirigidos y temas desarrollados y aclarar si las tesis son de maestría o de doctorado y si están en ejecución o han sido defendidas; en este último caso citar fecha.

 

q       Dirección de Tesis de Grado de Gabriela Riglos para la Licenciatura en Genética de la Universidad Nacional de Misiones, Posadas. Aislamiento y caracterización de mutantes de Sinorhizobium fredii (En ejecución).

MAESTRIAS

q       Dirección de Tesis de Maestría de Graciela Pastorino. Maestría en Biotecnología Facultad de Bioquímica y Farmacia UBA. Tema: Respuesta de Sinorhizobium fredii y Bradyrhizobium japonicum al estrés hídrico Libro de Actas N 1, Acta N°19, Folio 10. Buenos Aires 7 de Marzo de 2003.

q       Director de Tesis de Liliana B. Videira Maestría en Tecnología e Higiene de los alimentos Universidad Nacional de La Plata Tema: Características Nutricionales y Culinarias de cultivares comerciales de poroto Phaseolus vulgaris L. (En ejecución)

DOCTORADOS

q       Codirector de Tesis de Doctorado en Ciencias Naturales de la Lic. Victoria García. Tema: Evaluación y caracterización genética de polbaciones de Paspalum dilatatum Poir. Aprobada Sobresaliente 10 Acta 756 Facultad de Ciencias Naturales y Museo UNLP.2001

q       Codirector de Tesis de Doctorado en Ciencias Naturales de la Ing. Agr. Mabel Vazquez Facultad de Ciencias Naturales y Museos . Tema: efecto del riego complementario sobre las caracteristicas de los suelos y la actividad microbiana de los mismos (Tesis presentada en evaluación por comite asesor).

q       Codirector de Tesis de Doctorado en Ciencias Naturales de la Ing. Agr. García. Poir. Aprobada Sobresaliente 10 Acta 756 Facultad de Ciencias Naturales y Museo UNLP.2001

q       Director de Tesis de Doctorado de la Lic. Marta Galván. Tema
Análisis de la diversidad genética en poblaciones primitivas y silvestres de Phaseolus vulgaris, mediante técnicas basadas en PCR  Facultad de Ciencias Naturales y Museos UNLP. (En ejecución).

q       Director de Tesis de Doctorado del Ing. Agr. Sebastián Stenglein Tema: Patogenicidad de los aislamientos de Phaeoisariopsis griseola (Sacc.) Ferraris en variedades botánicas silvestres de poroto (Phaseolus sp.) Facultad de Agronomía Universidad de Buenos Aires Resolución D.848 Expte 121.088/02 3 de Diciembre de 2002

 

7.       PARTICIPACION EN REUNIONES CIENTIFICAS. Indicar la denominación, lugar y fecha de realización, tipo de participación que le cupo, títulos de los trabajos o comunicaciones presentadas y autores de los mismos.

 

2.       XXX Congreso Argentino de Genética 2000. Estimación de variabilidad mediante caracteres poligénicos y moleculares en poblaciones  naturales de pasto miel (Paspalum dilatatum Poir.). Garcia María V., Arturi Miguel J. y P.A. Balatti. Pag 143. Presentación de poster como coautor. Con Referato

3.       XXX Congreso Argentino de Genética.Marcadores ISSR: diversidad genetica y acervo de origen de los cultivares de porotos franceses y argentinos. Galván Marta, Bornet Benjamin, Balatti Pedro y Michel Blanchard. Pag 105. 2000. Presentación en forma de poster como coautor. Con Referato

4.       XXXVII Annual meeting of the Argentine Society for Biochemistry and Molecular Biology Research.Genetic diversity of willow (Salix sp.) based on RAPD markers. Raffaeli Natalia, Marlats Raul y Pedro A. Balatti. Biocell Vol 25 Supplement II Pag 66. Presentación en forma de poster como coautor. Con Referato

5.       XVIII Congreso Argentino de la Ciencia del Suelo. Puerto Madryn (Chubut), Argentina, 16-19 de Abril de 2002. Patrón de utilización de fuentes carbonadas por las comunidades heterotróficas de un suelo cultivado con trigo bajo labranza convencional y siembra directa. Diosma G., Chidichimo H.O. y Balatti. P.A.. Presentación en forma de poster como coautor. Con Referato

6.       XVIII Congreso Argentino de la Ciencia del Suelo. Puerto Madryn (Chubut), Argentina, 16-19 de Abril de 2002. Aislamiento y caracterización de rizobios de suelos ácidos y alcalinos que nodulan la soja. Martinez Alcántara V., Pastorino G.N., Videira L., Graham P. y Balatti P.A. Presentación en forma de poster como coautor. Con Referato

7.       . XVIII Congreso Argentino de la Ciencia del Suelo. Puerto Madryn (Chubut), Argentina, 16-19 de Abril de 2002. Mutagenesis de S.fredii, selección de mutantes e identificaciónde genes vinculados al pH. Martinez Alcántara V., Riglos G., Pastorino G., Videira L. y Balatti P.A Presentación en forma de poster como coautor. Con Referato

8.       18th North American Conference on Symbiotic Nitrogen Fixation and 20th Annual Missouri Plant Biology Symposium June 3-8, 2002  University of Missouri Columbia, Missouri,USA. Fast growing rhizobia isolated from china differ in their tolerance to acidity and nodulateand fix nitrogen on soybean .Martinez Alcántara V.1, Pastorino G.1, Espuny MR.2, Bellogin R.2, Videira L.1, Pastor M.D., Lorda G.3, Graham P.4 and P.A. Balatti1 . Presentación en forma de poster como coautor.

9.       18th North American Conference on Symbiotic Nitrogen Fixation and 20th Annual Missouri Plant Biology Symposium June 3-8, 2002  University of Missouri Columbia, Missouri,USA.Survival ability of Bradyrhizobium japonicum and Sinorhizobium fredii in soils under water stress. Graciela N. Pastorino, Videira L.B., Virginia Martinez Alcántara and P.A. Balatti. Presentación en forma de poster como coautor.

10.      Diversidad genética en poblaciones silvestres de Phaseolus vulgaris mediante marcadores RPD y faseolinas Galván Marta* y Balatti Pedro XXXI Congreso Argentino de Genética. La Plata, 17-20 de Septiembre de 2002. Presentación en forma de poster como coautor.

11.   Congreso Argentino de Horticultura. Estudios preliminares del agente causal de la mancha angular del poroto. Sebastian A. Stenglein*, Carina A. Reyes, Oscar N. Vizgarra, Daniel Ploper & Pedro A. Balatti. Presentación ON-line como coautor. Con Referato

 

12.   Congreso Argentino de Horticultura Variabilidad epidérmico-foliar en materiales Mesoamericanos de poroto negro. Sebastian A. Stenglein*, Ana M. Arambarri, Oscar N. Vizgarra & Pedro A. Balatti.. Presentación On-Line como coautor. Con Referato

 

 

1.       CURSOS DE PERFECCIONAMIENTO, VIAJES DE ESTUDIO, ETC. Señalar características del curso o motivo del viaje, período, instituciones visitadas, etc.

 

Ø       Visita del laboratorio del Dr. Michel Blanchard  para  escribir un proyecto de cooperación. Institut des Sciences Agro-alimentaires et du Monde Rural- Laboratorio de Biotecnología y Fisiología Vegetal ISAMOR Universidad de Bretaña Occidental Mayo de 2000

 

Ø       Visita del laboratorio del Dr. José E. Ruíz Sainz con el que se escribió un proyecto para su presentación en la Unión Euriopea Departamento de Microbiología Facultad de Biología Universidad Nacional de Sevilla Mayo de 2000.

 

Ø       Visita del laboratorio del Dr. Antonio deRon (Proyecto de Cooperación) UNLP-CSIC-Misión Biológica de Galicia Departamento de Mejora Vegetal- Pontevedra-Galicia- España.

 

 

Ø       Viaje al XVII Northamerican conference of nitrogen fixation Quebec, Canada 21 de Julio de 2000.

 

2.       SUBSIDIOS RECIBIDOS EN EL PERIODO. Indicar institución otorgante, fines de los mismos y montos recibidos.

 

·        Subsidio del Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas- CONICET para la adquisión de equipamiento por valor de $ 59.500. Resolución 083, 2001-09-12

·        Director del Proyecto Dinamica de las poblaciones de rizobios que nodulan la soja. PIP N02811 Financiado por el Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas CONICET. Susidio otorgado por resolución 792 del 4 de Junio de 2001 (Aprobación del Proyecto) Resolución para la entrega de la 1er cuota 8000 $ Resolución 1003 del 26 de Junio del 2001.

·        Director del Proyecto Sobrevivencia de rizobios de crecimiento rápido a las condiciones de estrés del suelo. Subsidio de la Universidad Nacional de la Plata   1600 $ Año 2001

 

 

3.       DISTINCIONES O PREMIOS OBTENIDOS EN EL PERIODO.

 

Distinguido con el nombramiento de Miembro de las comisión asesora académica del 18th North American Conference on Symbiotic Nitrogen Fixation and 20th Annual Missouri Plant Biology Symposium June 3-8, 2002  University of Missouri Columbia, Missouri,USA

 

 

4.       ACTUACION EN ORGANISMOS DE PLANEAMIENTO, PROMOCION O EJECUCION CIENTIFICA Y TECNOLÓGICA. Indicar las principales gestiones realizadas durante el período y porcentaje aproximado de su tiempo que ha utilizado

 

Ø       Evaluador de Proyectos de Investigación de la Agencia de Promoción Científica  SECYT.

Ø       Evaluador de Proyectos de Investigación de la  Universidad Nacional de Luján

Ø       Evaluador de Proyectos de Investigación de la Universidad Nacional de Buenos Aires UBA

Ø       Eval;uador de Proyectos de Investigación de la Universidad Nacional de Entre Ríos

Ø       Evaluador de Proyectos de Investigación del Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas

Ø       Evaluador de Ingreso y Promociones de investigadores a la Carrera del Investigador Científico  del Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas CONICET

Ø       Evaluador de Trabajos de  la Revista Forestal  YVYRARETA Instituto Subtropical de Investigaciones Forestales

 

5.       TAREAS DOCENTES DESARROLLADAS EN EL PERIODO. Indicar el porcentaje aproximado de su tiempo que le han demandado.

 

Durante los ciclos lectivos del 2001 y 2002 se desarrollaron las siguientes actividades docentes.

Profesor Adjunto Simple de Fisiología Vegetal- Se dictaron las clases Teóricas durante el primer semestre del año. Además se trabajó en la elaboración de exámenes parciales y formé parte de las mesas examinadoras de examenes finales.

Profesor Adjunto de Microbiología Agrícola- Se dictaron las clases teóricas durante el segundo semestre del año, se trabajó en la planificación y coordinación del dictado de clases prácticas- Se realizaron los exámenes parciales y formé parte de las mesas examinadoras de exámenes finales.

Además de estas actividades se trabajó en la redacción de material didáctico para los alumnos.

Se dictó el curso de posgrado de Introducción a la Biología Molecular. El curso estuvo dirigido a graduados en el area de las ciencias biológicas Licenciaturas de la Facultad de Ciencias Naturales y Museos, Ingenieros Agrónomos, Médicos Veterinarios, bioquímicos, etc.

           

El  Dr. Pedro Alberto Balatti, actuó como el coordinador y docente reponsable de las clases teóricas y prácticas.  En las clases prácticas intervinieron como colaboradores : Lic. Marta Galván,  Lic. Virginia Martinez Alcántara, Ing. Ftal. Natalia Raffaeli,  Ing. Graciela N. Pastorino y la Ing. Liliana B. Videira.

El curso tuvo una carga horaria de 40 horas

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Contenidos Temáticos Curso Introducción a la Biología Molecular

1.                  Propiedades estructurales del ADN-Fuerzas que intervienen en al doble helice-Disposición  de doble helice-Desnaturalización del ADN-Temperatura de desnaturalización del ADN- Paradigma de la genética-Complejidad del ADN- Separación del ADN en Cloruro de Cesio

2.                  Replicación del ADN- Replicación del ADN en procariotas y Eucariotas-Klenow Fragment Mecanismo de recombinacion y Reparación del ADN Rec A

3.                  Transcripción del ADN-Clases de RNA- RNA mensajero-ribosómico y RNA de transferencia. Transcripción en procariotas y eucariotas

4.                  Manipulación del ADN-Secuenciación del ADN-Clonación- Vectores de Clonación-Plasmidos-Cósmidos-BAC- Librerías genéticas -Mutagenesis dirigida- Cromosome Walking

5.                  PCR Bases de la reacción-Polymerasas termostables-Diseño de primers-RT-PCR- PCR cuantitativa-Genoma y proteomas- Nociones de su uso e importancia- Marcadores moleculares tipos y usos

Clases Prácticas

1.                  Preparación de drogas y reactivos para la extracción de ADN y RNA-Fuentes de información para el laboratorio-

2.                   Extracción de ADN y ARN- Determinación de la pureza y la cantidad del ADN-

3.                  Extracción de ADN de un gel de Agarosa-

4.                  Reacción en Cadena de la Polimerasa PCR RAPD-ISSR

5.                   Preparación de células competentes de E. coli

6.                  -Clonación de ADN-

7.                   Electroporación de células- Southern Blot.

 

 

OTROS ELEMENTOS DE JUICIO NO CONTEMPLADOS EN LOS TITULOS ANTERIORES.  Bajo este punto se indicará todo lo que se considere de interés para la evaluación de la tarea cumplida en el período.

 

Ø       Jurado de Tesis de Doctorado de la Lic. Carolina Morgante Tema: Mejoramiento de la Fijación Biológica del Nitrógeno en maní en suelos de la Provincia de Córdoba: estudios sobre la interacción maní-rizo en la Universidad Nacional de Río Cuarto

 

Ø       Vicedirector Interino del Instituto de Fisiología Vegetal (INFIVE) dependiente de la Facultad de Ciencias Naturales y Museos y el Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas CONICET.

 

Ø       Conferencia sobre las Plantas Transgénicas . Conferencista invitado a la Jornada Alimentos y salud, nuevas tecnologías y sus implicancias culturales. Alimentos Transgénicos. Organizadas por el Ministerio Público de la Provincia de Buenos Aires La Plata, 4 y 5 de Junio de 2002.

 

 

TITULO Y PLAN DE TRABAJO A REALIZAR EN EL PROXIMO PERIODO

El plan de trabajo a desarrollar en el próximo período se divide en dos areas fundamentales:

Interacción rizobio-soja y estudios de diversidad en el poroto y el agente causal de la Mancha Angular del Poroto.

       Con el fin de comprobar la hipótesis que los rizobios de crecimiento rápido y lento difieren en su respuesta al estres del suelo, se continuará con los estudios solo es del comportamiento de estos dos grupos de microorganismos en condiciones de estrés del suelo y con la identificación de estirpes con características de resistencia a alguno de las factores en estudio que son pH, textura del suelo, contenido de agua, temperatura, salinidad, contenido de nutrientes,etc. En el curso de estos mismos estudios se inducirán mutaciones con Tn5-mob con el fin de identificar mutantes con vventajas adaptativas a los estreses de suelo. La identificación de mutantes de este tipo permitirá identificar proteínas regulatorias o estructurales que están directamente relacionadas con la sobrevivencia de los organismos. La capacidad de sobrevivencia es variable de un organismo a otro. En estudios previos hemos demostrado que las cepas de Sinorhizobium fredii difieren en su capacidad de sobrevivencia en formulaciones comerciales de inoculantes. Es decir que el conocimiento de  los mecanismos biológicos que determinan el poder de sobrevivencia de las cepas puede tener aplicaciones tecnológicas concretas

       En lo relacionado a la diversidad genética de poroto y con el fin de comprobar la hipótesis de los cultivares silvestres de poroto presentan una mayor diversidad genética que los cultivares primitivo, se proseguirán los estudios del análisis de la diversidad por medio de un análisis de las faseolinas de la semilla. Además se extenderá el análisis de la variabilidad con un mayor número de marcadores RAPD e ISSR.

En lo que hace a la interacción Phaseolus vulgaris-P.griseola con el fin de probar la hipótesis de que Phaseolus vulgaris alberga genes de resistencia a la mancha angular del poroto y que los mismos están asociados a marcadores moleculares, se continuará realizando aislamientos del hongo. Los aislamientos serán caracterizados en base a su la respuesta de los 12 cultivares diferenciales de poroto a la infección del hongo y en base a marcadores moleculares RAPD e ISSR. Se realizarán nuevos cruzamientos de plantas resistentes y susceptibles a la mancha angular del poroto conel fin de estudiar, en plantas de F2, la segregación del caracter de resistencia a la enfermedad y de los marcadores moleculares. Esto permitirá identificar marcodres moleculares asociados a genes de resistencia a la enfermedad.

La metodología a emplear consiste en reacciones convencionales de amplificación en cadena de la polimerasa, utilizando diversos primers y programas. Además se utilizarán otras técnicas convencionales de biología molecular para comprobar la inserción simple de Tn5 y l;a identificación de los fragmentos de AND mutados. Además se utilizarán métodos de la genética convencional para realizar el cruzamiento de plantas para obtener F1 y F2. Los microrganismos, hongos y bacterias se cultivaran de acuerdo a las técnicas microbiológicas convencionales.

 

Condiciones de la presentación

 

La presentación deberá incluir:

a.       La carátula (puntos 1 a 5) en una copia en papel A-4.

b.       El informe propiamente dicho (puntos 1 a 20), únicamente en disquete, en formato RTF, protegido contra escritura, configurado para papel A-4 y libre de virus. Si se trabaja sobre el documento modelo, se deberán eliminar las instrucciones. En la etiqueta del disquete se consignará el apellido y nombre del investigador y la leyenda “Informe científico-tecnológico período .............”

c.       Las copias de publicaciones y toda otra documentación respaldatoria, en una carpeta o caja, en cuyo rótulo figure la misma leyenda que en el disquete. Cada copia o documento incluido llevará en forma visible el número que se le asignó en el informe. 

d.       En un segundo disquete, con los mismos requisitos que el del informe, se presentará un Currículum Vitae resumido (no máas de 3 páginas tamaño A-4)  y un resumen del proyecto de investigación en no máas de 250 ................palabras.

e.       Informe del Director de tareas (en los casos que corresponda), en sobre cerrado.

 

 

     Nota: El Investigador que desee ser considerado a los fines de una promoción, deberá solicitarlo en el formulario correspondiente, en los períodos que se establezcan en los cronogramas anuales .                    



[1] Art. 11; Inc. “e” ; Ley 9688 (Carrera del Investigador Científico y Tecnológico)